Probiyotiklerin Bağırsak Florası ve Kolon Kanseri Üzerindeki Etkilerin İncelenmesi

Abstract

Kolon kanseri, dünya genelinde farklı ülkeler arasında farklılık gösteren kanser türleri arasında öne çıkmaktadır. Gelişmiş ülkelerde, kolon kanseri sağlık alanında önemli bir sorun olarak kabul edilmektedir. Türkiye'de Sağlık Bakanlığı'nın verilerine göre, kadınlarda kolon kanseri tüm kanser vakaları içinde üçüncü sırada yer alırken, erkeklerde dördüncü sıradadır. Kolon kanserlerindeki artış hem ülkemizde hem de dünya genelinde yaygın olan beslenme alışkanlıklarındaki değişikliklerle doğrudan ilişkilidir. Bu yüzden araştırmacılar, kanser riskini azaltan besin takviyeleri geliştirmek ve optimal beslenme stratejilerinin önemini vurgulamak için büyük çaba sarf etmektedirler. Bu çalışmada, probiyotik olan Lactobacillus gasseri, Lactobacillus acidophilus, Bifidobacterium longum, Bacillus clausii, Bifidobacterium animalis metabolitleri kullanılmıştır. Bu metabolitlerin farklı dozlarının, ilk başta patojenlere (Escherichia coli, Staphylococcus aureus) karşı etkisi araştırılmıştır. Anaerobik çalışmalarda 24 saat inkübasyonda Staphylococcus aureus ve Escherichia coli üzerinde inhibisyon olarak en etkili olan probiyotik bakteri Bacillus clausii ondan sonra ise Bifidobacterium longum ve Bifidobacterium animalis olduğu gösterilmiştir. Anaerobik koşullarda 48 saat inkübasyonda ise probiyotik metabolitlerde de aynı etki gözlenmiştir. Ayrıca bağırsak florasına benzer olarak; anaerobik şartlarda etkileri değerlendirildiğinde, aerobik koşullara göre daha yüksek inhibisyon etkinliği saptanmıştır. Probiyotik metabolitlerimiz, İnsan Kolon Kanseri Hücre Hatları (HCT-116 ve HT-29) ve Sağlıklı Fibroblast hücre L929 hattı üzerinde test edilmiştir. Her üç hücre hattının 24 saatlik proliferasyonunda %50 azalmaya neden olan metabolitlerin inhibitör konsantrasyonu (IC50), hücre canlılık analizi kullanılarak belirlenmiştir. Sağlıklı hücre hatlarına karşı herhangi bir toksik etki göstermediğini ortaya koymak için kontrol olarak L929 hücresi üzerinde denenmişlerdir. Hücre canlılık sonuçlarına dayanarak seçilen Lactobacillus gasseri, Lactobacillus acidophilus ve Bifidobacterium animalis metabolitleriyle çalışılmıştır. Bu metabolitler, HCT-116 hücrelerine karşı en toksik etkiyi gösterirken L929 hücrelerine karşı olabildiğince az aktif olanlar olarak belirlenmiştir. Lactobacillus gasseri, Lactobacillus acidophilus ve Bifidobacterium animalis metabolitlerinin HCT-116 üzerindeki ve Bifidobacterium animalis metabolitinin HT 29 üzerindeki antiproliferatif ve apoptotik etkileri CellEvent™ Caspase‐ 3/7 Green Flow Cytometry Assay analizi ile araştırılmıştır. Probiyotik Bifidobacterium animalis ve Lactobacillus gasseri metabolitlerinin HCT-116 hücre hattında ve Bifidobacterium animalis metabolitinin HT-29 üzerinde antiproliferatif, apoptotik ve nekrotik etkilerin olduğu gösterilmiştir. Literatürde probiyotiklerin ve patojenlerin organizma düzeyinde hücrelerdeki etkilerine dair çalışmalar mevcut olsa da metabolitlerin hücre hatlarındaki etkileri ile ilgili yeterli çalışma bulunmamaktadır. Bundan dolayı çalışmamız kolon kanseri hücre hatları üzerinde sağladığı apoptotik etkinlik ve probiyotik metabolitlerin etkin bir tedavi yöntemi olarak değerlendirilmesine dair literatüre katkı sağlamaktadır.